分(fēn)别是1. Denaturation 2. Annealing of primers,3. Extension of primers。 所谓 Denaturing乃是将DNA加热(至90~95℃)变性, 将双股的DNA加热后转為(wèi)单股DNA以做為(wèi)复制的模板. 而Annealing 则是令 Primers于一定的温度下(冷却至55~60℃)附着于模板DNA两端。 最后在DNA聚合酶e.g. Taq-polymerase 的作用(yòng)下(加热至70~75℃)进行引物(wù)的延長(cháng) Extension of primers及另一股的合成。
PCR的最早设想核酸研究已有(yǒu)100多(duō)年的历史,二十世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的體(tǐ)外分(fēn)离技术,Korana于1971年最早提出核酸體(tǐ)外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物(wù)杂交,用(yòng)DNA聚合酶延伸引物(wù),并不断重复该过程便可(kě)克隆tRNA基因”。
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